雞抗體檢測方法有哪些

『壹』 哪些實驗室診斷能自己做怎麼做

要養雞，就會有雞生病。雞有了病，就必須盡快診斷，以便明確病因，採取措施，減少損失。即使是有豐富經驗的養殖人員，面對大量的雞病，也難以憑經驗進行准確的判斷。要確診，除了綜合流行病學、臨床檢查和病理剖檢的各方面結果外，最重要的是實驗室診斷。在農村中小型雞場，由於實驗設備條件和技術原因，難以開展實驗室診斷。但是，有的實驗方法所需要的技術要求並不高，具有初中文化程度和經一定的學習培訓是能夠掌握的。下面介紹部分比較簡單的方法，供參考應用。

（1）直接抹片鏡檢。

診斷麴黴菌病：加一滴水在載玻片上，再從肺部或氣囊上取結節病灶，用另一玻片壓碎、抹薄，在低倍顯微鏡下觀察菌絲和孢子。

診斷球蟲病：於病變腸段刮取或直接取少量粘膜，或取少量腸內容物，置載玻片上，抹薄，加一滴清水，於低倍鏡下觀察有無球蟲。

（2）製片染色鏡檢。其主要過程為塗片、固定、染色、鏡檢。

塗片：剪一塊肝或脾，將切面在潔凈玻片上輕壓一下，留下壓跡，自然乾燥。檢驗血液或其他液態病料時，用無菌玻片的一端蘸取少量液體，在另一無菌玻片中間均勻推出一塗面，自然乾燥。前者稱觸片，後者稱塗片。

固定：觸片或塗片制好後，用火焰固定滅菌，即在酒精燈火焰的上方迅速地來回通過3～4次，使片溫大約達到60℃即可。

染色：常用美藍染色和革蘭氏染色。

美藍染色：以30毫升美藍（亞甲藍）酒精溶液（0.3克美藍加30毫升酒精）與100毫升氫氧化鉀溶液（0.01克氫氧化鉀溶解於100毫升蒸餾水）即配成染色液（平時配好備用）。將染色液滴於觸片或塗片上，約2分鍾後傾去；再用清水沖洗，用吸水紙吸干或自然乾燥後即可鏡檢。

革蘭氏染色：用0.5%結晶紫水溶液滴於觸片或塗片上，經半分鍾傾去；傾去結晶紫溶液後，加碘溶液（碘片1克、碘化鉀2克、蒸餾水100毫升配成），並保留約1分鍾；用酒精洗去碘液，再用清水沖洗；用中性紅溶液（中性紅1克、1%醋酸2毫升、蒸餾水1000毫升配製）復染2～4分鍾。最後用清水沖洗，用吸水紙吸干或自然乾燥。

鏡檢：用油鏡觀察，染成紫色的細菌是革蘭氏陽性菌，紅色為陰性菌。

（3）瓊脂擴散。雞傳染性法氏囊炎、傳染性腦脊髓炎和馬立克氏病等均可用本試驗診斷。其原理是抗原抗體在固體載體上擴散發生特異性結合出現可見沉澱帶。具體操作是：

①澆板：取瓊脂糖1克，氯化鈉0.85克，1%硫柳汞1毫升，加蒸餾水至100毫升，在沸水浴融化，調整pH為7.0～7.4，在直徑8厘米的玻璃平皿中注入15毫升（瓊脂約2～3毫米），自然冷卻凝固。②打孔：用金屬管（直徑約3毫米）在瓊脂板上打孔，每7孔為一組，即中央1孔，周圍6孔，中央孔邊與周圍孔邊距離4毫米。然後用注射針挑去孔內瓊脂，並將玻皿底部在墊有石棉網的電爐上稍加熱，使瓊脂板略微融化，封住孔底。③加樣反應在中央孔加入抗原，周圍孔加被檢雞血清；或在中央孔加抗體（陽性血清），在周圍4個孔加被檢雞樣品（抗原），另2個孔加陽性抗原（如圖）。如有相應的抗體或抗原經24小時（室溫）反應就會在中央孔和周圍孔之間出現白色沉澱帶。診斷不同的傳染病可分別用其中一種。供試驗用的標准抗原和標准抗體（陽性血清）統稱診斷液，可從獸醫科研單位購買。診斷液是生物制劑，需低溫保存，一般只有6個月的保存期。

『貳』 臨床上常用的血清學檢查方法有哪幾種

主要有沉澱試驗、凝集試驗、補體結合試驗、中和試驗及與標記抗體有關的試驗。

（1）凝集試驗

包括玻板凝集法、全血平板凝集法、試管凝集法和瓊脂擴散法。

①全血平板凝集反應

此法常用於傳染性鼻炎、雞白痢、雞傷寒、雞慢性呼吸道病等禽病的檢疫和監測。

②瓊脂擴散反應

當適當比例的抗原抗體在含有電解質的瓊脂網狀基質中自由擴散相遇時，形成肉眼可見的白色沉澱線。此法常用於雞傳染性法氏囊病、雞馬立克氏病、禽流感、禽腦脊髓炎、禽腺病毒感染等病的診斷，還常用於抗體監測和血清學流行病學調查。

（2）血凝與血凝抑制試驗

試驗原理：某些病毒能夠與人或動物的紅細胞發生凝集，稱為血凝反應（HA）。這種凝集反應可被加入的特異性血清所抑制，稱為紅細胞凝集抑制試驗，即血凝抑制反應（HI）。

此方法常用於雞新城疫、禽流感、雞產蛋下降綜合征等病毒的診斷和血清學監測。