A. 艾滋病檢測項目包括哪些
艾滋病檢測項目包括哪些
AIDS的實驗室檢測主要包括HIV抗體、HIV核酸、CD4+T淋巴細胞、HIV基因型耐葯檢測等。HIV1/2抗體檢測是HIV感染診斷的金標准;HIV核酸定量(病毒載量)檢測和CD4+T淋巴細胞計數是判斷疾病進展、臨床用葯、療效和預後的兩項重要指標;HIV基因型耐葯檢測可為高效抗反轉錄病毒治療(HAART)方案的選擇和更換提供科學指導。下面是我為大家帶來的關於艾滋病檢測項目的`知識,歡迎閱讀。
01抗體檢測
主要有酶聯免疫吸附試驗(ELISA)和免疫熒光試驗(IFA)。ELISA用去污劑裂解HⅣ或感染細胞液提取物作抗原,IFA用感染細胞塗片作抗原進行抗體檢測,如果發現陽性標本應重復一次。為防止假陽性,可做Westernblot(WB,蛋白印跡法)進一步確證。
WB法是用聚丙烯醯胺凝膠電泳將HⅣ蛋白進行分離,再經傳移電泳將不同蛋白條帶轉移於硝酸纖維膜上,加入病人血清孵育後,用抗人球蛋白酶標抗體染色,就能測出針對不同結構蛋白抗體,如抗gp120、gp41、P24抗體,特異性較高。
快速檢測法,也稱為金標法,也是抗體檢測的一種方法,根據免疫層析法的原理,用於HⅣ抗體檢測的定性檢測。
02抗原檢測
用ELISA檢測P24抗原,在HⅣ感染早期尚未出現抗體時,血中就有該抗原存在.由於P24量太少,陽性率通常較低。現有用解離免疫復合物法或濃縮P24抗原,來提高敏感性。
03核酸檢測
用PCR法(聚合酶鏈式反應法)檢測HⅣ基因,具有快速、高效、敏感和特異等優點,目前該法已被應用於HⅣ感染早期診斷及艾滋病的研究中。
04病明圓毒分離
常用方法為共培養法,即用正常人外周血液分離單個核細胞,加PHA(聚羥基脂肪酸脂)刺激並培養後,加入病人單個核細胞診斷及艾滋病的研究中。
05檢測試紙檢測
艾滋病檢測試紙條是使用膠體金免疫層析科技研發的新一代檢測試劑。它可檢測血清或血漿標本中的HⅣ-1/2特有性抗體。所有操作時間約是15分鍾,操作簡便、迅速、准確、自帶質控對照。適合各大醫院,疾控中心篩查。
其中第五種方法還適合個人檢測
艾滋病檢測試紙
1、適用者:臨床檢驗、無償獻血現場篩查等。
2、目的:快速方便准確的確診是否感染HIV。
3、操作時間:約15分鍾。
4、優點:簡便、迅速、准確、自帶質控對照。
試紙分類
常見有兩種,一種是血檢試紙,一種是唾液試紙。
血檢試紙一般有雅培、艾康、金豪萬泰等,其中雅培是較好的艾滋病試紙。唾液檢測試紙有一種美國激逗塌艾威爾的的唾液檢測試紙。
正規艾滋病檢測試紙生產批號均可以國家食品葯物監督管理局查詢。
作用效果
因為高危人群艾滋病檢測注重隱私保護,所以艾滋病檢測試紙自測成了高危人群比較接受的檢測方式。而值得提醒的是,雖然網購試紙可以完全匿名購買,保護自己的隱私,但沒有醫護人員的專業操作和對個人情況的分析和疾病宣導,就算自檢結果出來後,自己還是會對指清試紙的准確性產生懷疑。那倒不如到疾控中心檢測,除了提供免費檢測服務外,還提供專業咨詢服務。
目前艾滋病檢測試紙也是一種先進的艾滋病抗體檢測技術,准確情況下,5~15分鍾即可出現檢測結果,單次艾滋病檢測結果的准確率高達95%以上。
;B. 可以用於進行hiv抗體檢測的有哪些
1、人類免疫缺陷病毒(HIV)1+2型抗體診斷試劑(膠體硒法)
雅培人類免疫缺陷病毒抗體診斷試劑(膠體硒法)用於體外,肉眼觀察,定性的免疫分析,檢測血清或血漿中的HIV-1和HIV-2抗體,用於幫助受感染個體的HIV-1和HIV-2抗體。本品僅用於無償獻血員現場初篩及臨床緊急情況的使用,本品檢測陽性者,需進行進一步篩查確認。
2、InstantCHEKTM-HIVl+2金標快速診斷試劑
InstantCHEKTM-HIV1+2為一種快速、簡單、靈敏的檢驗方法,用以檢測艾滋病病毒(HIV-1和HIV-2)的抗體。該方法適用於初篩檢測,凡由該試劑測定為陽性者,需用另一種方法檢測如ELISA或用蛋白印記法確定。
(2)用於進行hiv抗體檢測的樣品有哪些擴展閱讀
HIV1/2抗體篩查方法包括ELISA法、化學發光法或免疫熒光試驗、快速檢測(斑點ELISA和斑點免疫膠體金或膠體硒快速試驗、明膠顆粒凝集試驗、免疫層析試驗)等,確證試驗常用的方法是免疫印跡法。
篩查試驗呈陰性反應可出具HIV1/2抗體陰性報告,見於未被HIV感染的個體,但處於窗口期的新近感染者篩查試驗也可呈陰性反應。
若呈陽性反應,應用原有試劑和另外一種不同原理或不同廠家的試劑進行重復檢測,或另外兩種不同原理或不同廠家的試劑進行重復檢測,如兩種試劑復測均呈陰性反應,則為HIV抗體陰性;如有一種或兩種試劑呈陽性反應,需進行HIV抗體確證試驗。確證試驗無HIV特異性條帶產生,報告HIV1/2抗體陰性。
C. 簡述hiv樣品運送有哪些具體要求
一、血清樣品採集和處理:
對於艾滋病和HIV感染的診斷,血清樣品檢測HIV抗體。可用真空采血管采血5—10ml(確定采樣量)靜脈血,室溫下自然放置1—2h,待血液凝固後用3000rpm,離心15分鍾,吸取血清HIV抗體檢測。血清樣品置2—8℃冰箱保存7天。
若用檢測試劑檢測HIV抗體,也可用末梢全血,成人、兒童或幼兒可選擇中指、無名指採集、足跟部位采血。采血部位用75%酒精或碘伏認真消毒皮膚,用EDTA毛細管吸取血樣。采血結束後,徹底止血,完成後的穿刺針頭丟棄於耐穿透的容器內,妥善處理,嚴防職業暴露損傷。
採集血漿或全血應實驗項目要求選用的抗凝劑,CD4/CD8+T淋巴細胞測定可選用EDTA或肝素。本實驗室完成的實驗盡早完成,完成檢測項目,採集後在規定限時內及時送到,避開採集不當、暫存環境與時間的延誤等因素而影響檢測結果,如要檢測CD4/CD8+T淋巴細胞測定的樣品應選擇合適的抗凝劑, 血樣檢測抗凝劑用EDTA(5 ml)若用EDTA鉀鹽血樣品應在30h以內,盡早(8h以內)處理用ACD或肝素抗凝,血樣在48h以內,盡早(8h)處理。靜脈採集血樣運用EDTA鉀鹽真空管,採集後立即顛倒混勻8--10次,使血液與抗凝劑混勻,對樣品編號、日期、採集時間。
二、樣品的保存:
用於抗體檢測的血清或血漿樣品,應存放在-20℃,短期在一周內檢測的樣品可存放於2-8℃。HIV檢測陽性血清樣品可保存至少十年。艾滋病篩查實驗室存放陽性血清,陽性血清有資質的實驗室可存放(確認艾滋病實驗室)用於CD4/CD8+T淋巴細胞測定樣品採集時
間超過48小時則檢測。HIV檢測陽性反應血清樣品均保有著艾滋病檢測確認實驗室,,在HIV陽性反應血清樣品較多的地區,艾滋病檢測確認實驗室應配置-20℃的低溫冰箱和-80℃的超低溫冰箱保存。
三、樣品的運送:
確認陽性反應的血清或血漿,應WHO的三級包裝系統。層容器:裝樣品、防滲漏。樣品應置於帶蓋的試管內,試管上有明確的標記、受檢者的姓名、種類和採集時間。在試管周圍應墊有緩沖吸水,以防碰碎。隨樣品應附有送檢單。要填寫送檢單種類信息,分開放置。層容器:要求耐受性好的、防滲漏、容納保護層容器,容器便於消毒處理。層容器:是運輸用於外層包裝內,應易於消毒。在層容器外面要貼有標簽(註明數量、收樣單位等內容)血清或血漿樣品應在2--8℃條件下專人運送。
檢測檢測CD4/CD8+T淋巴細胞測定的清或血漿溫樣品應在室溫下(18--23℃)運送。但三級包裝要求將盛樣品的試管放好,避開使用玻璃容器,以保證不會破碎和滲漏。運送要有感染防護措施。
四、樣品的接收
在有感染源設備的實驗室內由經過培訓、則在生物安全櫃中戴手套、口罩、戴防護衣、帶防護眼鏡、的工作人員打開,用後的包裹應消毒。認真核對樣品盒送檢單、檢查樣品有無破損和滲漏,如滲漏立即將存留的樣品移出,對樣品管和滲漏消毒,檢查樣品情況,有無溶血、微生物污染、血脂過高及黃疸等情況,污染或溶血等情況樣品被接受,則應將樣品安全廢棄,並要將樣品情況立即通知送樣人或單位。打開標本容器時要小心,以防皮膚或粘膜污染,以防內容物潑濺。
aware天貓唾液檢測不用抽血!
D. HIV的檢測步驟有哪些
目前艾滋檢測方法很多,步驟也不同。可以到醫院或疾控免費檢測,也可在家自測唾液收集器天貓檢測項目的樣品種類
1. HIV 抗體檢測:全血、血清、血漿、口腔黏膜滲出液、尿液以及干血斑樣品。
2. HIV 抗原檢測:全血、血清、血漿、病毒培養上清液。
3. T 淋巴細胞亞群測定:EDTA 或肝素抗凝全血。
4. HIV-1 病毒載量、基因型、耐葯檢測:血漿、濾紙干血斑(DBS)。
5. HIV 核酸定性與定量、基因型檢測和 HIV-1 分離培養:淋巴細胞富集液、外周血單核淋巴細胞(PBMC)及全血。
當然,實驗室最常用的仍然是血液標本,其他只作為補充樣本。
HIV 抗體檢測
HIV 抗體檢測是艾滋病實驗室檢測的優先選擇項目,在國內絕大多數初篩實驗室應用最廣泛。
1. 初篩方法
(1)酶聯免疫吸附試驗(ELISA)
ELISA 法檢測 HIV 抗體是 HIV 初篩實驗室最常用最普遍的方法,目前檢測試劑已經發展到第四代,即同時檢測血液中 HIV-1P24 抗原和 HIV-1/2 抗體,秉承「寧可錯殺一千,不可漏網一個」的革命精神,其靈敏度遠高於特異性,直叫 HIV 抗體無處遁形。
(2)化學發光或免疫熒光試驗(CIA/IFA)
這個試驗方法是近 10 年迅猛發展的一種新型檢測方法,其採用發光或熒光底物,既可檢測抗體,也可聯合檢測抗原抗體,用發光或熒光儀測定結果,其靈敏度較 ELISA 有了進一步的提高,同時帶來的是檢測成本的增加和假陽性率的增高。
(3)快速檢測(RT)方法
此類方法操作簡便快速,適用於應急檢測、門診急診檢測,但靈敏度和特異性遠不如 ELISA 和發光法,但是經濟實惠,也有一定的市場影響力。主要包括以下幾種方法:明膠顆粒凝集試驗(PA)、免疫滲濾試驗、免疫層析試驗。
2. 確認實驗
(1)免疫印跡試驗(WB)
WB 採用間接法檢測樣品中的抗 HIV-1/HIV-2 特異性抗體。採用聚丙烯醯胺凝膠電泳把分子量大小不等的 HIV-1 蛋白分離開來,經過一系列處理後,硝酸纖維素膜顯示與特異抗原的結合的抗體條帶,從而確診抗體的存在。
(2)條帶/線性免疫試驗(RIBA/LIA)
實驗原理基本同 WB 法,不再贅述。
HIV-1 抗原檢測
1. 篩查實驗
(1)酶聯免疫吸附實驗(ELISA 法):即第四代抗原抗體聯合檢測試劑盒。抗體包被固相反應孔(管)的底部,待測樣本中 P24 抗原與包被抗體形成抗原抗體復合物,再加入酶(HRP)標記的 HIV-1 抗體與抗原結合,加底物顯色,在酶標儀上讀取結果。因同時檢測抗原抗體,靈敏度大大提高,有效縮短了 HIV 感染的檢測窗口期,但因試劑成本較高,在普通篩查實驗室推廣有一定難度。
(2)酶聯熒光分析法(ELFA):待測樣品的 p24 抗原與包被在固相孔(管)內的 p24 抗體結合,並被生物素標記的 p24 抗體識別。臨床實驗室應用前景不明朗,需要熒光檢測設備,成本較高。
(3)電化學發光法(ECLIA):待測樣品的 p24 抗原與包被抗體的磁性微粒和發光劑標記的抗體在反應管中溫育,形成磁性微珠包被抗體-抗原-發光劑標記抗體復合物。
(4)抗原抗體快速檢測法:同快速方法(RT)檢測抗體,不同之處是用 HIV 抗體包被載體,檢測靈敏度同樣較差。
2. 中和試驗
中和試驗主要是 p24 抗原檢測的補充試驗,還可做 HIV-1RNA 的定性或定量檢測,以排除篩查試驗的假陽性。
(1)酶聯免疫吸附實驗(ELISA 法):待檢樣品先與中和劑(p24 抗原的抗體)共同孵育,如果樣品中存在 p24 抗原,中和抗體將與之結合形成復合物,而不能與固相載體上的捕獲抗體結合。
(2)酶聯熒光分析法(ELFA):原理和檢測步驟同上述酶聯免疫吸附實驗(ELISA 法),中和率 ≥ 60 %,認為樣品中的 p24 抗原是真陽性。
(3)電化學發光法 (ECLIA):原理和檢測步驟同上述酶聯免疫吸附實驗(ELISA 法),中和率大於 50%,認為樣品中的 p24 抗原是真陽性。
HIV 核酸檢測
目前國內 HIV 核酸檢測試劑主要為 Taqman 實時熒光 PCR 檢測試劑,可檢測血漿、血清、組織器官或血液製品的 HIV-1RNA 和 DNA,DBS 可用於檢測 RNA/DNA。全球目前正式用於臨床診斷 HIV-1 急性期感染的核酸檢測試劑比較少,主要是美國 FDA 批準的 Gen-Probe 公司生產的 Aptima HIV-1 RNA 核酸定性檢測試劑和歐盟批準的 Abbott M2000 HIV-1 RNA/DNA 定性檢測試劑。
臨床診斷相關的檢測策略及結果報告
HIV 檢測陽性結果的檢測過程一般經歷兩個階段,初篩和復檢程序。以 HIV 抗體檢測為例,具體流程如下:
試劑 1 進行初篩,結果無反應,報告「HIV 抗體陰性」;結果有反應,不能出具陽性報告,必須進入復檢試驗。對初篩有反應的樣品,用原有試劑雙份或雙孔進行復檢試驗(或者兩種試劑復檢),如均無反應,報告「HIV 抗體陰性」;如均有反應或一個有反應一個無反應,進行補充試驗(抗體確證試驗和 HIV-1 核酸試驗),報告 HIV 感染待確定。